细胞迁移试验
除了通过血液将氧气输送到身体各个角落的红细胞外,组成生命体的大量细胞中的大多数都在不离开特定位置的情况下发挥作用。相反,有些细胞在血液和身体组织中活跃,比如免疫细胞。本页解释细胞迁移和用来评估它们的分析方法。
细胞迁移和如何评估它
细胞迁移是指细胞从一个位置移动到另一个位置。例如,细胞迁移可以观察到伤口愈合的过程中划伤或轻微损伤在表皮愈合。当皮肤遭受创伤时,血液中的凝血因子被激活,在伤口处形成血凝块以阻止出血(凝血阶段)。接下来,作为免疫反应的一部分,炎症细胞如中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞迁移到伤口并清除死亡组织(炎症期)。巨噬细胞释放的物质召集该区域的成纤维细胞迁移到伤口,生成用于修复的胶原蛋白,并促进血管生成形成肉芽组织(增殖期)。最后,表皮组织细胞迁移,使伤口边缘收缩和闭合(重塑阶段)。伤口会在这些阶段愈合。
细胞通过细胞外基质(ECM)并穿透周围组织称为细胞浸润。例如,当因细菌或病毒感染而发生炎症时,作为机体防御反应的一部分,中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等炎症细胞向炎症部位密集迁移,浸润炎症组织,引起炎症细胞浸润。其他类型的细胞侵袭包括肿瘤侵袭(癌细胞侵袭),即肿瘤细胞如癌细胞浸润并扩散到邻近的组织或器官中。
细胞迁移在伤口愈合、细胞分化和胚胎发育中起着重要的作用。另一方面,如果在细胞迁移过程中出现某种错误,则可能导致肿瘤形成、肿瘤转移和/或癌症转移等严重后果。因此,细胞迁移参与人体的不同过程。
细胞迁移分析的类型
细胞迁移分析允许您检查研究目标细胞的迁移能力或入侵机制,或研究促进细胞迁移和入侵的因素和条件。细胞迁移分析被用于研究药物和化妆品引起的细胞迁移增强,研究肿瘤和癌症转移,研究和开发药物来控制它们,以及其他治疗方法。本节介绍了用于测量和评估细胞迁移和侵袭的典型细胞迁移分析方法。
趋化性试验
免疫细胞,如白细胞(中性粒细胞)、巨噬细胞和淋巴细胞,以及成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞和肿瘤细胞,都是趋化细胞,或根据周围存在的某些化学物质的浓度梯度迁移的细胞。它们的细胞迁移是由趋化因子(一种细胞因子)和其他趋化因子触发的。当细胞向较高的化学浓度迁移时,称为正向趋化。当细胞向较低浓度的化学物质迁移时,被称为负趋化作用,而引起这种反应的化学物质被称为化学驱避剂。在检测趋化性的细胞迁移实验中,通过孔内的膜插入物并粘附在放置趋化因子的底部的细胞为迁移细胞,而不通过膜插入物并停留在过滤器上方的细胞为非迁移细胞。
趋触性试验
在评估亲和性的细胞迁移试验中,膜插入物的底部(背面)涂有胶原蛋白或纤维连接蛋白-趋化因子,这些趋化因子对成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞,被放置在一个孔中来检测细胞是否会被这些化学物质吸引并向其迁移以确定细胞是触壁的还是非触壁的。此外,结合到ECM或细胞粘附位点的趋化剂浓度梯度可用于测量不同细胞的迁移能力。
伤口愈合实验
这是一种在多孔板中复制伤口愈合条件的体外试验。在一种被称为划痕试验的典型方法中,免疫细胞迁移和浸润故意造成的伤口以进行评估。伤口修复过程中细胞浸润的测量,包括伤口愈合过程中组织基质的产生,所涉及细胞的差异,以及在不同培养条件下的细胞增殖和浸润,可用于药物的研究、开发和评估。
细胞入侵检测
癌细胞最终从最初形成的地方分离出来,通过破坏基底膜渗透到邻近的组织中。然后癌细胞转移到血管中,随血液转移到身体的不同部位。当癌细胞在转移到的地方增殖时,癌症转移就发生了。当癌细胞浸润组织时,细胞黏附、基底膜和外基质中发生蛋白水解和细胞迁移。利用这一特性,可以使用涂有胶原蛋白、层粘连蛋白或基底膜基质溶液的膜插入物来识别和测量细胞肿瘤。细胞浸润可以评估,抑制浸润的物质可以通过在体外环境中测量促进细胞浸润的细胞,使用24孔或96孔板进行研究。细胞培养后染色,以识别和量化细胞肿瘤。
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细胞迁移分析是通过使用适合的检测试剂盒来进行的,通过测量细胞迁移和浸润来评估细胞迁移能力和其他特性。在相同的环境条件下,使用24孔或96孔板来确保必要的样品数量,但使用常规显微镜和人工操作计数器分析和测量大量的样品需要大量的时间和精力。同时分析和测量许多井中活细胞的状态和变化不仅困难,而且容易受到人类相关测量误差和评估变化的影响。即使在使用自动细胞计数器时,含有活细胞的样品的转移也会很麻烦。在某些情况下,仅根据大小识别不同的细胞是很困难的。
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